顯微鏡生物玻片的制作可分為以下三步:
清洗生物玻片、制作涂片、制作裝片
一、生物顯微鏡切片清洗
顯微鏡標本切片的清洗將直接影響生產(chǎn)質(zhì)量,因此制作顯微鏡標本切片的**步是清洗載玻片和蓋玻片。
新購買的生物玻片不可以直接用,要先在95%的酒精中浸泡,去除表面的附著物,在使用前取出,晾干或烘干備用。
用過的舊生物玻片,先用肥皂水或洗衣粉水煮0.5h,冷卻后用軟刷刷掉污垢,用自來水沖洗,放入95%酒精中備用。如果是石蠟切片,可以先在二甲苯中浸泡幾個小時(可以用制片時回收的廢棄二甲苯,既能避免環(huán)境污染,又能節(jié)省實驗成本),溶解用于密封的樹膠,將蓋玻片和玻片分開,然后用肥皂水煮。
二、制作生物顯微鏡切片步驟
1)制作生物顯微鏡切片需要的材料有:蓋玻片、載玻片、解剖針、刀片、毛筆等
2)取材→切片→選片→固定與染色→脫水→透明→封片
1、取材完整;選擇標本應(yīng)力求新鮮,如果內(nèi)部構(gòu)造發(fā)生糜爛,制片觀察會影響標本結(jié)構(gòu)的完整。
2、切片時,切片和材料上都應(yīng)不時地沾上水;動作要均勻有力,一刀切下,不得拉割或中途停頓。
3、在切完片子后,先把玻片放在30%酒精水溶液中,讓酒精的張力自動把皺摺展開,然后再將玻片移到熱水,這樣的片子會較薄;如酒精濃度過高,容易引起玻片破碎,出現(xiàn)裂隙,像脂肪之類細胞間粘附性較小的組織一碰到酒精就會散開,故不能用此法。
4、載玻片、蓋玻片要清洗干凈。
5、把制作好的切片或者需要觀察的培養(yǎng)液滴進蒸餾水中。
6、拿著蓋玻片使用約四十五度的角慢慢放下,讓蓋玻片蓋住標本不要有氣泡,被擠出來的多余的水用吸紙給吸干這樣就算可以完成了。
7、封片時,樹膠滴加要適量,以蓋玻片蓋上時樹膠剛好擴散至其邊緣為宜;樹膠濃度也要適當(dāng),要既有一定的粘稠度又不能過于濃,可以在蓋玻片下緩緩散開為宜。