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超分辨熒光顯微鏡可以識(shí)別與癌細(xì)胞孵育的血小板中特定的蛋白質(zhì)分布模式

返回列表 來(lái)源:本站 發(fā)布日期:2023-06-07 09:58:49【

血小板的蛋白質(zhì)含量經(jīng)常在腫瘤發(fā)展和轉(zhuǎn)移時(shí)改變。然而,癌細(xì)胞如何影響血小板內(nèi)蛋白質(zhì)選擇性的重新分布和釋放,從而促進(jìn)腫瘤的發(fā)展,在很大程度上仍然遙遙無(wú)期。通過(guò)基于熒光的超高分辨率激發(fā)發(fā)射耗竭(超分辨顯微鏡)成像,我們揭示了與腫瘤進(jìn)展和轉(zhuǎn)移有關(guān)的特定蛋白質(zhì)在血小板中如何在可溶性激活劑(凝血酶,二磷酸腺苷和血栓烷A2)下重新分布。與癌細(xì)胞(MCF-7,MDA-MB-231,EFO21)或非癌細(xì)胞(184A1,MCF10A)一起孵育。癌細(xì)胞孵育后,發(fā)現(xiàn)細(xì)胞粘附蛋白P-選擇素重新分布為圓形納米結(jié)構(gòu),與血小板內(nèi)儲(chǔ)存蛋白的α-顆粒向膜內(nèi)的積累相一致。

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這些變化的程度要小得多,甚至根本不存在于與正常細(xì)胞孵育的血小板中,或在經(jīng)歷了可溶性血小板活化劑作用的血小板中。從這些模式中,我們開(kāi)發(fā)了一種分類(lèi)程序,通過(guò)該程序可以自動(dòng),客觀地識(shí)別暴露于癌細(xì)胞,非癌細(xì)胞,可溶性激活劑以及未激活血小板的血小板。我們證明,與電子顯微鏡和共聚焦顯微鏡相比,超分辨顯微鏡成像具有必要的空間分辨率和標(biāo)記效率,可以識(shí)別血小板中的蛋白質(zhì)分布模式,并可以解決它們?cè)诓煌せ钋闆r下如何發(fā)生特異性變化。結(jié)合血小板內(nèi)特定蛋白質(zhì)分布模式的圖像分析,超分辨顯微鏡成像可因此在未來(lái)基于血小板的癌癥診斷和治療監(jiān)測(cè)中發(fā)揮作用。提出的方法還可以使癌細(xì)胞-血小板相互作用的基本機(jī)制和非接觸式細(xì)胞間相互作用大體上更加清晰。

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