在日常生活中,室內(nèi)飛揚(yáng)的微粒灰塵是不易被看見(jiàn)的,但在暗的房間中若有一束 光線從門縫斜射進(jìn)來(lái),灰塵便粒粒可見(jiàn)了,這是光學(xué)上的丁達(dá)爾現(xiàn)象。暗視野顯微鏡就是利用此原理設(shè)計(jì)的。它的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)主要是使用中央遮光板或暗視野聚光器,常用的是拋物面聚光器,使光源的中央光束被阻擋.不能由下而上地通過(guò)標(biāo)本進(jìn)入物鏡。從而使光線改變途徑,傾斜地照射在觀察的標(biāo)本上,標(biāo)本遇光發(fā)生反射或散 射,散射的光線投入物鏡內(nèi),因而整個(gè)視野是黑暗的。
在暗視野中所觀察到的是被檢物體的衍射光圖像.并非物體的本身,所以只能看到物體的存在和運(yùn)動(dòng),不能辨清物體的細(xì)微結(jié)構(gòu)。但被檢物體為非均質(zhì)時(shí),并大于1/2波長(zhǎng),則各級(jí)衍射光線同時(shí)進(jìn)入物鏡,在某種程度上可觀察物體的構(gòu)造。一般暗視野顯微鏡雖看不清物體的細(xì)微結(jié)構(gòu),但卻可分辨0.004um以上的微粒的存在和運(yùn)動(dòng),這是普通顯微鏡(*大的分辨力為0.2um)所不具有的特性,可用以觀察活細(xì)胞的結(jié)構(gòu)和細(xì) 胞內(nèi)微粒的運(yùn)動(dòng)等。